Extraktion und Chromatographie von Blattfarbstoffen

Chemikalien:
10
5
1
1
 mL
mL
mL
 Ethanol
Petrolether (Sdp.40-60°C)
Aceton
Kieselgel-Fertigfolie für DC 40 x 80 mm
Geräte:
1
1
1
2
1
1
1
1
1
1
1
 Magnetheizrührer
Thermoblock
Digital-Thermometer (Digitemp)
Reaktionsgefäße 24mL
Schraubverschluss 20mm
Gewinderohr
Schraubkupplung 20/20
PTFE-Filterträger
Filterpapier
Miniatur-Rührmagnet
Glaskapillare

Aufbau der Apparatur und Versuchsdurchführung:

  1. Thermoblock auf den Magntheizrührer stellen und auf 100°C einregulieren. (Temperaturkontrolle mit Digital-Thermometer Digitemp).
  2. 10 mL Ethanol in das Reaktionsgefäß 24mL füllen und einen Miniatur-Rührmagneten hinzugeben.
  3. Schraubkupplung 20/20 auf das Reaktionsgefäß aufschrauben. PTFE-Filterträger und Filterpapier in die Schraubkupplung 20/20 einlegen und Gewinderohr aufschrauben.
  4. Ein bis zwei Brennesselblätter in das Gewinderohr stecken.
  5. Fertige Apparatur in den Thermoblock stellen und bei einer Blocktemperatur von 100°C erhitzen.

Beobachtung:

Nach kurzer Zeit kondensiert im Gewinderohr das grün gefärbte Lösemittel. Durch Herausnehmen der Apparatur aus dem Thermoblock und Abkühlen des Reaktionsgefäßes fließt das Lösemittel in das Reaktionsgefäß zurück. Der Extraktionsvorgang kann nun mehrfach wiederholt werden. Die Blätter im Gewinderohr werden deutlich heller bis farblos und sind bei Versuchsende spröde geworden.

Chromatographie des Extraktes:

  1. Einen 1 cm breiten Streifen von der Kieselgel-Fertigfolie abschneiden.
  2. Blattfarbstoffextrakt etwa 1cm vom unteren Rand der DC-Folie entfernt mit einer Kapillare auftragen (bei schwach gefärbten Extrakten zwei bis dreimal).

In ein Reaktionsgefäß 10 Tropfen Laufmittelgemisch (Petrolether/Aceton im Verhältnis 5 : 1) geben, DC-Folie einstellen und das Reaktionsgefäß mit einem Schraubverschluss 20 mm verschließen. Nach einer Entwicklungszeit von ca. 8-10 Minuten DC-Folie zur Auswertung entnehmen.

Ergebnis: Chlorophyll b (gelbgrün), Chlorophyll a (blaugrün), Xanthophyll (gelb) und Carotin (orange) können anhand ihrer Farbe und des chromatographischen Verhaltens nachgewiesen werden.